Тирзепатид Импуритиес

Тирзепатид Импуритиес|Контрола нечистоћа тилпептида|Прилагођена синтеза нечистоћа и потврда структуре|Наука{0}}Пептид

Контрола нечистоћа тирзепатида - за ГЛП-1/ГИП дуал-истраживање квалитета лека за циљ, извештавање о генеричким лековима.Наука-Пептид обезбеђује прилагођену синтезу нечистоћа повезаних са тилпептидом, укључујући пептиде за брисање, оксидоване нечистоће, масне киселине, податке о структури масних киселина, итд. Можемо да подржимо ваше податке за пилинг, можемо да подржимо ваше производе за пилинг, можемо да подржимо ваше производе за пилинг, студија спектроскопије нечистоћа са подацима о структурној потврди. Добродошли да нас контактирате.

Тирзепатид (Тирзепатид) је ГЛП-1/ГИП двоструки агонист који је Ели Лилли смислила и био је у пуном замаху ове две године. Има добар ефекат снижавања шећера и снажан ефекат смањења тежине, а назива се надограђеном верзијом "чудотворног лека за мршављење". Домаћи произвођачи пептидних генеричких лекова, многи се загледају у то – по истеку патента, ко може прво да прође кроз квалитет истраживања, ко ће имати прилику да зграби први генерички.

 

Међутим, квалитет тилпептида није тако лако проучавати. Сложенији је од симетикона, са 39 аминокиселина, бочним ланцем масних киселина (еикозандиоична киселина) и повезивачем. Нечистоће које се могу појавити током процеса синтезе су много веће од оних код обичних пептида. Пептиди који недостају, оксидативне нечистоће, производи одвајања масних киселина, димери, нечистоће повезане са линкером- морају имати контролу, свака мора бити чиста.

 

Сакупили смо много искуства у синтези комплексних пептидних нечистоћа. Специјализовали смо се за проучавање тилпептида и знамо које су потешкоће у његовом профилу нечистоћа и које су битне контролне ставке. Можемо да прилагодимо синтезу различитих контрола нечистоћа тилпептида према вашим потребама, са подацима о потврди структуре, и да вам помогнемо да успоставите метод тако да ће вам бити мање вероватно да ћете добити додатак приликом подношења.

Молекуларна структура тилпептида одређује да је његов профил нечистоћа много сложенији од профила општих пептида. Када радимо студије нечистоћа, углавном се фокусирамо на ове категорије:

Недостаје пептид
39 аминокиселина, од којих је било која пропуштена током процеса синтезе, је нечистоћа. Времена задржавања недостајућих пептида на ХПЛЦ била су широко распрострањена, са различитим поларитетима пептида који недостају на различитим позицијама. Неки недостају на Н-крају, неки на средини, а неки близу места везивања за масне киселине. Добили смо поруџбину од купца за 15 недостајућих пептида на различитим позицијама како бисмо локализовали све могуће нечистоће које недостају у њиховом процесу.

Оксидирајуће нечистоће
Мет у секвенци тилпептида је подложан оксидацији у сулфоксид, а затим у сулфон. Оксидоване нечистоће се често појављују у студијама стабилности и расту након одређеног временског периода. Урадили смо поређење, под убрзаним условима за месец дана, врх оксидације може да порасте на више од 0,3%, без контроле.

Производи за излучивање масних киселина
Ово је нечистоћа јединствена за тилпептид. Његов бочни ланац масне киселине (еикосандиоична киселина) је везан за лизин преко повезивача, а ова модификација се може делимично одвојити током синтезе или складиштења, што доводи до уклањања нечистоћа-од ​​масних киселина. Што је још проблематичније, до распадања може доћи на различитим локацијама - између масне киселине и повезивача, или између повезивача и пептида -, што доводи до различитих нечистоћа. Синтетизовали смо неколико нечистоћа у вези са-масним киселинама за наше купце, у распону од потпуног осипања до само малог дела.

Димери/полимери
Два или више тилпептидних молекула се групишу да формирају димер или више. Молекуларна тежина димера је двоструко већа од главног пика, а често је широки пик на ХПЛЦ-у, тако да мора бити посебно одвојен и пречишћен пре него што се може користити као контрола. Урадили смо припрему димера и било је потребно неколико рунди пречишћавања да би се постигла чистоћа већа од 95%.

Нечистоће{0}}повезане са линкером
Модификација тилпептида масном киселином користи повезивач (нпр. -Глу, ПЕГ, итд.), а овај линкер може сам да произведе споредне реакције током синтезе, стварајући нечистоће са недостајућим или непотпуним линкерима. Ова врста нечистоће се не налази у уобичајеним пептидима, али је јединствена за тилпептид, који треба посебно проучавати.

Деамидиране нечистоће
Аспарагин (Асн) и глутамин (Глн) се лако деамидирају у киселим условима или условима загревања, што резултира изомерима. Постоји неколико Асн и Глн у секвенци тилпептида, а нечистоћа деамидације се често појављује у тесту присилне деградације, тако да се контролни производ мора користити за лоцирање нечистоће.

дијастереоизомери
Током синтезе дугог ланца, појединачне аминокиселине могу бити подвргнуте рацемизацији, што доводи до дијастереоизомера. Садржај ове врсте примеса обично није висок, али ће се стручњаци питати приликом декларисања, а за потврду је боље имати контролни производ.

Многе од ових нечистоћа се не могу купити и треба их синтетизовати по мери. Урадили смо много пројеката на прилагођавању нечистоћа тилпептида, покривајући све горе наведене категорије.

Брисање серије пептида
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, уз МС и НМР потврду. Синтетизовали смо скуп пептида са размаком од 5 аминокиселина од Н-терминала до Ц-терминала.

Оксидирајуће нечистоће
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% и можемо да обезбедимо ЛЦ-МС спектар да потврдимо степен оксидације. Сулфоксид и сулфон су раздвојени ХПЛЦ-ом, а можемо и једно и друго.

Производи за излучивање масних киселина
Ово је једна од најтежих нечистоћа за рад у тилпептиду. Ланац масних киселина може бити потпуно искључен, или може бити делимично искључен (нпр. недостаје последњих неколико угљеника). Можемо синтетизовати низ варијанти за различите позиције ланца. У једном од најкомпликованијих пројеката које смо урадили, купац је тражио од нас да синтетишемо нечистоћу са 8 угљеника који недостају у ланцу масних киселина и требало нам је два месеца да то исправимо.

Димер
Димери формирани унакрсним-повезивањем или не-ковалентним интеракцијама могу се припремити различитим методама и изоловати и пречистити да би се обезбедиле контроле високе чистоће. Димере је тешко пречишћавати, али имамо искуство да знамо како да одвојимо мономере.

Нечистоће{0}}повезане са линкером
Повезивач (-Глу, ПЕГ, итд.) можда недостаје или је непотпун, што доводи до низа повезаних нечистоћа. Можемо синтетизовати различите варијанте са недостајућим линкерима, скраћеним линкерима или неусклађеним линкерима и помоћи вам да изградите спектар таквих нечистоћа.

Деамидиране нечистоће
За Асн и Глн места у секвенци, можемо припремити контроле деамидираних нечистоћа принудном деградацијом или циљаном синтезом. Разлика у молекуларној тежини након деамидације је само 1, што није лако разликовати помоћу МС-а, тако да обично користимо НМР или посебне хроматографске услове за потврду.

Друге прилагођене нечистоће
Ако у свом истраживању пронађете нову непознату нечистоћу, можемо вам помоћи да анализирате структуру и да је синтетишете. Пошаљите нам узорке, ми ћемо урадити ЛЦ-МС анализу, закључити структуру, затим усмерену синтезу, а затим упоредити време задржавања и масени спектар да бисмо потврдили сагласност. Овај процес смо радили много пута и стопа успеха је прилично висока.

Развој и валидација аналитичких метода
Приликом подешавања ХПЛЦ или ЛЦ-МС методе, потребна је контрола нечистоћа за локализацију, одређивање раздвајања, верификацију линеарног опсега и опоравак. Без контроле, валидацији методе недостаје део. Многи купци траже од нас да прво урадимо неколико кључних нечистоћа да бисмо поставили метод, а затим полако надокнадили остатак.

Хетерогена масена спектрометрија
Када се генерички лек декларише, потребна је свеобухватна квалитативна и квантитативна анализа процесних нечистоћа и производа разградње. Контролни производ треба да потврди локацију, садржај и структуру сваке нечистоће. Видели смо да је декларација информација послата да се попуни, девет пута од десет је нечистоће овог комада није разумео.

Студије стабилности
У дуготрајној-стабилности и убрзаним тестовима, неопходно је утврдити који производи деградације су доминантни и какав је тренд у садржају. Са контролом нечистоћа, можемо прецизно квантификовати и пратити. Купац је радио на стабилности припреме тилпептида и открио је да је врх разградње растао веома брзо у убрзаним условима, па смо га анализирали и синтетизовали од стране МС-а да потврдимо структуру, а затим је купцу лакнуло што је то пријавио.

Тестирање пуштања серије
Након комерцијализације, свака серија АПИ-ја или формулације треба да се тестира на дотичну супстанцу. Контроле нечистоћа су суштински алати за тестирање ослобађања.

Информације о декларацијама генеричких лекова
Студије нечистоће су кључни део информација о архивирању. Обезбеђивање комплетног профилисања нечистоћа и контролних података значајно смањује ризик од поновног објављивања.

Случај 1: фармацеутска компанија, програм генеричких лекова за тилпептиде
Они развијају генеричку верзију тилпептида и потребан им је комплетан сет контрола нечистоћа за валидацију методе. За њих смо прилагодили 12 нечистоћа: 5 пептида који недостају, 2 оксидоване нечистоће, 1 димер, 2 производа за излучивање масних киселина и 2 нечистоће повезане са линкером. Сваки од њих има чистоћу већу од 95%, а прате га МС и НМР подаци. Вођа пројекта је рекао: "Нечистоће тилпептида су двоструко више од других пептида, али можете их направити све, а подаци су потпуни, што нам штеди много посла." Касније је валидација њиховог метода успешно завршена и сада се припремају за декларацију.

Случај 2: ЦРО компанија, профилисање нечистоћа
Они су предузели квалитетан истраживачки пројекат о тилпептиду, који је захтевао свеобухватну анализу процесних нечистоћа. Послали су нам узорке сирових пептида, а ми смо извршили ЛЦ-МС анализу, закључили могуће структуре неколико непознатих нечистоћа, затим их синтетизовали на циљани начин и упоредили времена задржавања и масене спектре, и потврдили четири нове нечистоће - од којих су две биле повезане са линкером-, а две од њих су биле варијанте са масноћом. Клијент је користио ове податке да прецизира профиле нечистоћа и успешно је прошао клијентово прихватање.

Случај 3: Студије стабилности, биотехнолошка компанија
Испитивали су стабилност формулације тилпептида и открили да се количина производа разградње брзо повећава под убрзаним условима, али нису знали шта је то. Анализирали смо узорак помоћу ЛЦ-МС и претпоставили да се ради о нечистоћи деамидирања на одређеном месту Асн, а затим смо га синтетизовали на циљани начин и потврдили поређењем. Они су успоставили тест користећи ову контролу и прецизно пратили тренд производа разградње. Касније, када су поднели извештај, овај део података су стручњаци нагласили, а због солидних података није издата одштета.

Тилпептид је популаран производ, али проучавање нечистоћа је деликатан посао, посебно производи за пилинг масних киселина и нечистоће повезане{0}}које многи произвођачи не могу да поднесу. Ако радите квалитетно истраживање или генерички развој тилпептида и требате контролу нечистоћа, слободно нас контактирајте. Урадили смо много посла, знамо које су потешкоће и знамо како да их превазиђемо.